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 TMT标记定量技术

      Thermo Scientific公司的TMT (Tandem Mass Tag) 标记定量技术和AB SCIEXTM公司的iTRAQ技术都属于二级报告离子定量技术,具有相似的原理(图1):提取样品中的总蛋白并酶解为多肽,多肽N-term以及末端Lysine侧链基团的游离氨基能够与TMT标签进行共价结合,从而使每条多肽都带上至少一个TMT标签;不同TMT标签具有相同的分子量,但是却有不同的同位素分布,来自不同样品的相同多肽在MS1中同时被分离,经裂解后在MS2中释放出reporter,代表该多肽在对应样品中的相对含量。 TMT (iTRAQ) 最高可同时标记10 (8) 组不同的生物样品,且一次性完成全部样品的定性定量分析,显著的提高了实验通量,降低了定量误差,可发现更细微的生物学差异。

图1. TMT标签结构和定量原理。

技术优势
通量与深度的完美结合:在质谱本身高通量的基础上,TMT技术又进一步扩大了这种优势,相比SILAC、Dimethyl等标记定量技术,TMT可同时完成多至10个不同样品的定量分析;运用high pH反相HPLC分级为8个组分,每个组分再经low pH反相HPLC分离,两次正交液相分离,显著的提高了鉴定和定量深度。
特异性与灵敏度兼备:基于质谱的蛋白质组学精确到单个氨基酸位点,蛋白鉴定准确,灵敏度高,是profiling分析和PTM研究的强大工具。
严格的质量控制:数据稳定、重现性好,定量动态范围广,多个样品平行处理极大的降低了实验误差。
专业的数据分析:标准的搜库流程,专业的统计和生信分析,出版级的图表展示,完整全面的分析报告。

样品要求

样品类型

样品要求

蛋白质提取物

浓度 >1μg/μl,蛋白质总量 >200μg

细胞样品

细胞量 >5×106

组织样品

动物、微生物组织湿重  >100mg

体液样品

血液体积 >500μl,血清、血浆、脑脊液 >500μl,尿液 >50ml

 
技术流程
 
应用领域
疾病标志物筛选
分子机制研究
药物作用靶点研究
特殊功能蛋白质筛选

仪器平台
Thermo Scientific EASY-nLC 1200
Thermo Scientific Q Exactive

Protein
产品信息
免疫印迹优质内参
Raybiotech细胞因子抗体芯片
二级抗体
SpringBio高通量抗体芯片
免疫印迹相关试剂盒
技术服务
蛋白-蛋白相互作用
RNA-蛋白相互作用
非标定量技术(LFQ)
TMT标记定量技术
非标定量磷酸化
TMT定量磷酸化
细胞因子抗体芯片及技术服务
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