康成生物LOGO   登录 | 注册 | English
 
 
 
 
站内搜索
 
 
  测序服务
 
  芯片服务
 
     
当前位置: 首页 > 技术> 内容  
 RNA实验样品采集、保存方法
1.1 适用范围及样品量
● 适用范围

● 样本量
 
1.2 动物组织样品
1.2.1 新鲜组织样品
A、使用RNAlater试剂
● 取新鲜组织(注:生物体死亡后尽快在10分钟内取材),组织块以PBS或生理盐水清洗干净,所用组织必须切至厚度在0.5 cm以下(长宽不限),然后放入装有5倍体积RNAlater的离心管(或冻存管)中。
● 4℃孵育过夜,此时样品管需要横置以便组织块充分接触到RNAlater,然后转入-20℃中保存。样品在-20℃不会冻结,但是溶液中可能有一些晶体出现,这并不影响后续的RNA抽提。
B、使用Trizol试剂
● 取新鲜组织(注:生物体死亡后1分钟内取材料并保存好),组织块以PBS或生理盐水清洗干净,每50~100 mg组织加1 ml Trizol溶液匀浆裂解组织样品,操作最好在冰上进行。
● 匀浆的裂解液4℃短期保存(1个月),-20℃或-70℃长期保存。
 
1.2.2 冻存组织
● 生物体死亡后尽快(最好在10分钟内)切取新鲜组织,以PBS或生理盐水清洗干净切为小块;
培养液倒入离心管中,离心沉淀细胞,弃去上清液。
● 细胞沉淀(1×107个细胞)中加入1ml的Trizol裂解液。
● 反复吸打几次后,目视可见细胞层溶解完全。
● -70℃保存。
 
1.3.2 贴壁细胞
● 从培养容器中吸出并弃去培养液。
● 培养瓶中直接加入Trizol试剂,Trizol用量与细胞贴壁面积有关,约15cm2细胞贴壁 面积加入1ml Trizol。
● 反复吸打几次后,目视可见细胞层溶解完全。
● -70℃保存。
 
1.4 植物组织样品
● 准确取得所需新鲜组织后,如有必要可用PBS清洗干净,将所用组织切碎,装入冻存管中或者用锡箔包裹好。
● 立即投入液氮中保存。
 
1.5 血液类样品
详见:血液类样品采集、保存方法。

样品的采集、保存与运输
相关文献
血液类样品采集、保存方法
RNA实验样品采集、保存方法
DNA实验样品采集、保存方法
蛋白实验样品采集、保存方法
样品保存和运输
回到页首
 
  沪ICP备16042410号 ©Copyright 2007 KangChen Bio-tech Inc. All rights reserved.
版权声明  |  关于康成  |  联系我们